Von hippel lindau tumour suppressor protein production as a tool for the evaluation of anticancer molecules

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dc.contributor.advisorBetancor Dutrenit, Lorena
dc.contributor.advisorJackson Carvalho, Erienne
dc.contributor.tribunalRipoll Pérez, Magdalena
dc.contributor.tribunalOrtiz Carrión, Cecilia
dc.creatorTabachnik Pargman, Agustina
dc.date.accessioned2023-10-23T19:32:12Z
dc.date.available2023-10-23T19:32:12Z
dc.date.issued2023
dc.descriptionIncluye bibliografía y anexos.
dc.description.abstractEl objetivo del siguiente trabajo final de carrera es estudiar el proceso de agregación amiloide de la proteína supresora de tumores von Hippel-Lindau (pVHL), que está implicada en varias enfermedades hereditarias y desarrollo tumoral. Estas moléculas se utilizaron en estudios anteriores para otras proteínas amiloidogenicas y se ha demostrado que inhiben la agregación, por lo que se probaran para VHL. Los experimentos se llevaron a cabo con VHL Wt y dos mutantes: R167W y P86L. Primero, las proteínas se expresaron con éxito en Escherichia coli BL21 utilizando el plásmido pET14b que contiene el gen objetivo. Posteriormente, se realizó un estudio del proceso de purificación utilizando dos estrategias: cromatografia Ni-NTA y Ni-IDA. Sin embargo, el método Ni-NTA mostró mayores rendimientos de pureza y eficiencia, obteniendo un 69% de pureza y un rendimiento de 1.9 mg de proteína / g de pellet para VHL Wt. A continuación, se realizó una diálisis para lograr el replegamiento de VHL. Además, se realizó una cromatografía de exclusión molecular en un FPLC para VHL Wt como paso analítico, pero los resultados sugieren que podría añadirse como un paso de purificación. Por último, se realizaron diversas pruebas bioquímicas, incluyendo Thioflavin-T, Congo Red y turbidez, en presencia y ausencia de NQTrp y EGCG. Los resultados indican la inhibición de la agregación en presencia de ambas moléculas probadas; sin embargo, sigue siendo inconcluso determinar cuál molécula inhibe la agregación de manera más efectiva. Este proyecto sirvió como una primera aproximación para comprender mejor los inhibidores de agregación, abriendo un amplio rango de futuras investigaciones para desarrollar un fármaco terapéutico para el síndrome von Hippel-Lindau.
dc.format.extent66 p. il., tbls., grafs.
dc.identifier.citationTabachnik Pargman, A. (2023). Von hippel lindau tumour suppressor protein production as a tool for the evaluation of anticancer molecules (Trabajo final de carrera). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Recuperado de: https://rad.ort.edu.uy/handle/20.500.11968/6566
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11968/6566
dc.languageInglés
dc.publisherUniversidad ORT Uruguay
dc.relation.otherhttps://sisbibliotecas.ort.edu.uy/bib/94920
dc.subjectPROYECTOS-BI
dc.subjectCÁNCER
dc.subjectPROTEÍNA AMILOIDOGÉNICA
dc.subjectVON HIPPEL-LINDAU (VHL)
dc.titleVon hippel lindau tumour suppressor protein production as a tool for the evaluation of anticancer molecules
dc.typeTrabajo final de carrera
ort.thesis.careerFI - Ingeniería en Biotecnología - BI
ort.thesis.degreegrantorFacultad de Ingeniería
ort.thesis.degreelevelCarrera Universitaria
ort.thesis.degreenameIngeniera en Biotecnología
ort.thesis.degreetypeTrabajo final de carrera
ort.thesis.noteTrabajo final de carrera (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería
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