Nanobiosensor colorimétrico para la detección de toxina épsilon de Clostridium perfringens Tipo D

Abstract

La toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D (etx) es uno de los principales antígenos implicados en la enterotoxemia de animales domésticos y una de las infecciones que más afecta al ganado. El principal método de profilaxis es la utilización de vacunas veterinarias. Para su elaboración se realizan fermentaciones industriales de la bacteria C. perfringens. La mejora de las metodologías para la preparación de las vacunas como en la estandarización de puntos críticos, mejoraría la calidad y aumentaría el rendimiento de tales procesos. Para esto se busca una metodología rápida que permita analizar y cuantificar la etx, para reducir tiempos y disminuir el capital invertido en testeo y pruebas in vivo. Un nanobiosensor permite la detección y/o cuantificación de un analito de interés de manera inmediata utilizando interacciones biológicas que luego son transducidas mediante un transductor para que puedan ser leídas por el usuario. En este trabajo, se busca el desarrollo de un nanobiosensor basado en nanopartículas de oro, capaz de generar un cambio colorimétrico según la concentración de toxina épsilon a la que se lo enfrente, logrando implementar un control en la fermentación de C. perfringens para la producción de vacunas veterinarias mediante el seguimiento a pie de reactor de la concentración producida de etx, optimizando así los tiempos de fermentación y estandarizando la concentración final de cada batch. Con el protocolo óptimo de preparación y tras desafiar el nanobiosensor con muestras puras de etx, se obtuvo una respuesta que implicó un cambio colorimétrico de la suspensión de nanopartículas proporcional a la concentración de etx en relaciones molares de nanopartículas:etx de 1:100.