Desarrollo de una estrategia para la obtención de nanobodies contra las toxinas botulínicas A y B de Clostridium botulinum

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dc.contributor.advisorAchigar Rivero, Rodrigoes
dc.contributor.advisorSanguinetti Acosta, Carlos Julioes
dc.contributor.tribunalUmpiérrez Failache, Marianaes
dc.contributor.tribunalVanrell Majo, Lucia Mariaes
dc.creatorCeretta Maestro, Martina
dc.creatorRamos Francolino, María Belén
dc.date.accessioned2019-03-29T07:53:24Z
dc.date.available2019-03-29T07:53:24Z
dc.date.issued2018es
dc.descriptionIncluye bibliografía y anexoses
dc.description.abstractEl botulismo es una enfermedad causada por las neurotoxinas de la bacteria Clostridium botulinum, consideradas como las sustancias tóxicas de mayor potencia dentro de las actualmente conocidas. Esta enfermedad es poco frecuente, pero al mismo tiempo potencialmente letal, tratable y prevenible. Consecuentemente, un correcto diagnóstico es imprescindible para aplicar las medidas terapéuticas adecuadas y mejorar el pronóstico del paciente. El método empleado más ampliamente para la detección de las toxinas ha sido el Ensayo por Inmunoabsorción Ligado a Enzimas (ELISA), que utiliza anticuerpos convencionales específicos. No obstante, estas moléculas presentan algunas desventajas que han limitado su potencial para determinadas aplicaciones, dado que su obtención es compleja e implica elevados costos, y su gran tamaño reduce la sensibilidad y estabilidad. En los últimos años, se han estudiado y comenzado a utilizar otras moléculas de unión al antígeno, más pequeñas y versátiles, que presentan algunas ventajas sobre los anticuerpos convencionales como los nanobodies. Los nanobodies o VHHs son uno de los fragmentos de reconocimiento de antígeno más pequeños que se conocen, comprenden únicamente la región variable de la cadena pesada de los anticuerpos de camélidos. Gracias a su facilidad de manipulación mediante biología molecular y otras ventajas estructurales y funcionales, se presentan como una prometedora alternativa a los anticuerpos convencionales para numerosas aplicaciones biotecnológicas, como herramienta de investigación, diagnóstico y terapia. En este trabajo, se desarrolló por primera vez en el laboratorio una estrategia para la obtención de VHHs específicos contra las neurotoxinas botulínicas A (BoNT A) y B (BoNT B) a partir de secuencias obtenidas de una biblioteca de fagos derivada de una llama inmunizada con estos antígenos. Se evaluó su expresión recombinante a diferentes escalas, con diferentes vectores plasmídicos (pET-28a y pBAD/HisA) en de Escherichia coli. Estos VHHs podrían ser potencialmente beneficiosos para el desarrollo de reactivos recombinantes para la detección rápida de las toxinas botulínicas, para mejorar el diagnóstico y tratamiento del botulismo. Además, esta estrategia podría ser extensible a otras moléculas o blancos de interés.es
dc.format.extent68 p. diagrs., fot., tbls., grafses
dc.identifier.citationRamos Francolino, M. B. (2018). Desarrollo de una estrategia para la obtención de nanobodies contra las toxinas botulínicas A y B de Clostridium botulinum (Trabajo de Grado). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Recuperado de https://rad.ort.edu.uy/handle/20.500.11968/3919es
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11968/3919
dc.languageEspañol.es
dc.publisherUniversidad ORT Uruguayes
dc.relation.otherhttps://bibliotecas.ort.edu.uy/bibid/88498es
dc.subjectENFERMEDADESes
dc.subjectPROYECTOS-BIes
dc.subjectCLOSTRIDUM BOTULINUMes
dc.subjectBOTULISMOes
dc.titleDesarrollo de una estrategia para la obtención de nanobodies contra las toxinas botulínicas A y B de Clostridium botulinumes
dc.typeTrabajo final de carreraes
ort.thesis.careerFI - Licenciatura en Biotecnología - BIes
ort.thesis.degreegrantorFacultad de Ingenieríaes
ort.thesis.degreelevelCarrera Universitariaes
ort.thesis.degreenameLicenciada en Biotecnologíaes
ort.thesis.degreetypeTrabajo de Gradoes
ort.thesis.noteTrabajo de Grado (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingenieríaes
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