Browsing by Author "Vázquez Ortiz, Carolina Sofía"

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    Diseño y puesta a punto de un sistema de diagnóstico de PCR en tiempo real para las mutaciones en los genes que codifican para Factor II, Factor V y Metilentetrahidrofolato reductasa
    (Universidad ORT Uruguay, 2015) Elgue Romaníz, Martina; Vázquez Ortiz, Carolina Sofía; Abin Carriquiry, Juan Andrés; Tedesco Cambon, María Sofía; Tucci Pi, Paula Isabel
    En el presente trabajo se procedió a diseñar y poner a punto un sistema de diagnóstico de detección y genotipado de los polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs) C677T, G20210A y G1691A, utilizando la tecnología de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (Real-Time PCR). Para lograr tal objetivo se diseñaron tres juegos de primers en el que cada uno amplifica un fragmento que contiene el SNP. A su vez, se seleccionaron y diseñaron sondas específicas de secuencia denominadas TaqMan marcadas con distintos fluoróforos. Se diseñaron dos sondas por SNP evaluado, donde cada par contiene la misma secuencia exceptuando un solo nucleótido correspondiente al SNP. La fluorescencia emitida por cada fluoróforo es proporcional a la cantidad de producto específico de ADN amplificado. Por otro lado, la puesta a punto de la PCR en Tiempo Real se realizó en las plataformas ABI Prism® 7500 (Applied Biosystems), a partir de ADN genómico obtenido por tres métodos de extracción diferentes y en el equipo Rotor-Gene™ (Corbett) mediante un solo método. Estos métodos se compararon en cuanto a calidad y cantidad de ADN obtenido, versatilidad, sencillez, tiempo de procesamiento y costos.
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    Diseño, puesta a punto y validación de un método cualitativo para la detección del virus de la hepatitis B mediante las técnicas Loop Mediated Isothermal Amplification y PCR en Tiempo Real
    (Universidad ORT Uruguay, 2017) Elgue Romaníz, Martina; Vázquez Ortiz, Carolina Sofía; Abin Carriquiry, Juan Andrés; Urioste Amarillo, Carlos Javier; Fajardo, Álvaro
    El virus de Hepatitis B (HBV) es de relevancia clínica ya que puede generar cirrosis, cáncer hepático y puede desencadenar en enfermedad crónica. HBV es el tipo más serio de las hepatitis ya que se estima que cada año mueren 780.000 personas debido a las consecuencias de este virus. En Uruguay, aproximadamente dos de cada cien personas padecen infección con HBV. El diagnóstico molecular es la utilización de técnicas de biología molecular en la detección de distintas enfermedades. Este tipo de diagnóstico ofrece mayor sensibilidad, especificidad y rapidez con requerimientos mínimos de muestra, en comparación con las pruebas convencionales. En el presente trabajo se procedió a diseñar, poner a punto y validar un sistema de diagnostico molecular para la detección de HBV basado en la técnica de LAMP (Loop Mediated Isothermal Amplification) y PCR en Tiempo Real. En el transcurso de este trabajo se logró satisfactoriamente diseñar, poner a punto y validar un sistema de PCR en Tiempo Real para la detección del virus de Hepatitis B. Asimismo, se logró iniciar en el laboratorio ATGen Diagnóstica el desarrollo del método LAMP el cual es un método novedoso e innovador pero no se consiguió obtener buena sensibilidad ni robustez.