Browsing by Author "Risi Fernández, Gastón Andrés"

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    Caracterización e inmovilización de lipasas para su aplicación en la síntesis de biodiesel
    (Universidad ORT Uruguay, 2015) Risi Fernández, Gastón Andrés; Garat Núñez, María Pía; Ferrari Callejas, Mariana Isabel; Betancor Dutrenit, Lorena; Horjales Falcone, Sofía
    El objetivo general del presente trabajo fue el estudio de lipasas de distinto origen y su inmovilización para su posible aplicación como catalizadores en la generación de biodiesel a partir de aceite vegetal. Para ello se utilizaron dos estrategias de inmovilización: el atrapamiento y la unión covalente en nanopartículas de sílica. Se trabajó con tres lipasas derivadas de distintos organismos: Rhizomucor miehei (RML), Thermomyces lanuginosus (TLL), y Bacillus thermocatenolatus (BTL2). Se logró optimizar un protocolo de inmovilización para dichas lipasas. Asimismo se evaluó la estabilidad de dichos inmovilizados a altas temperaturas. Se determinó la capacidad de generar biodiesel utilizando una técnica cromatográfica (TLC) para visualizar los resultados. Se comprobó la capacidad de uno de los inmovilizados realizados con TLL de generar biodiesel luego de 24hs. Se obtuvo un alto porcentaje de conversión (estimado en un 90%) ya que se observó una desaparición de los triglicéridos y una aparición del oleato de etilo. Estos ensayos son prometedores en la utilización de enzimas inmovilizadas para la producción de biodiesel.
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    Clonado y expresión de proteínas de la vía de la dismutación del malato de Caenorhabditis elegans para el futuro desarrollo de drogas antihelmínticas
    (Universidad ORT Uruguay, 2016) Risi Fernández, Gastón Andrés; Salinas Grecco, Marcos Gustavo; Bonilla Chao, Mariana Magdalena; Correa Bove, Agustín
    El presente trabajo se enmarca en una línea de investigación centrada en el estudio de la vía de dismutación del malato Caenorhabditis elegans, ruta ausente en mamíferos y, por tanto, potencial blanco de acción para fármacos antihelmínticos. La investigación consistió en la producción recombinante de proteínas involucradas en esta vía, para ser luego utilizadas en la generación de anticuerpos contra las mismas, con el fin último de obtener las proteínas nativas por “pulldown”. Es así como se planteó la expresión recombinante de ciertas proteínas de C. elegans como subunidades del complejo II, proteínas de la ruta biosintética de la ubiquinona y proteínas que podrían estar involucradas en la síntesis de la rodoquinona. Para todos ellas, se diseñaron primers y se ajustaron las condiciones de PCR. Se clonaron los ADNc de interés, por el método restriction free y para cuatro de ellos se estudió la expresión de las proteínas recombinantes en E. coli. Finalmente, se logró expresar 2 proteínas en forma insoluble.