Browsing by Author "Ravera Sellanes, Enya"
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- ItemUso de nanopartículas como herramientas para la transfección de células de mamíferos(Universidad ORT Uruguay, 2022) Ravera Sellanes, Enya; Gera Lanzillotti, María Lucía; Mulet Navarro, Ana Paula; Betancor Dutrenit, Lorena; Jackson Carvalho, Erienne; Pagotto, Romina María del LujanEl presente trabajo final de carrera tiene como propósito el desarrollo de nanovehículos a base de oro y sílica y su comparación como herramientas de transfección en células de mamíferos frente a métodos tradicionales. El uso de líneas celulares de mamíferos como modelos in vitro se utiliza para la producción de proteínas recombinantes y anticuerpos, estudios de función y regulación génica, producción de vacunas, entre otros. Sin embargo, muchas de estas aplicaciones requieren que las líneas celulares sean modificadas genéticamente mediante el empleo de diferentes técnicas de transfección celular. La eficacia, toxicidad y reproducibilidad, así como la limitada capacidad de transporte de ADN, son aspectos críticos que generan una demanda en tecnologías de transfección más avanzadas. Las nanopartículas presentan múltiples ventajas como potenciales vehículos para la transfección de líneas celulares. Para ello se estudió la unión entre el ADN y las nanopartículas, así como también el efecto citotóxico de estas sobre las líneas celulares NM2C5-GFP y HEK-293. Se realizaron ensayos de transfección empleando nanopartículas como vehículo para el “delivery” del sistema CRISPR-Cas9 en ambas líneas celulares, y se evaluó la eficiencia de la mutación generada en relación con la obtenida bajo el uso de lipofectamina como agente de transfección. La línea celular NM2C5-GFP no pudo ser modificada bajo los métodos estudiados, pero si se logró una mutación en el gen CASP8AP2 de la línea celular HEK-293 mediante el uso de lipofectamina y un nanovehículo a base de sílica.