Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante

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Date
2016
Authors
Demarco Guareschi, Ornella
Publisher
Universidad ORT Uruguay
DOI
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Abstract
En este trabajo, el objetivo principal fue producir un antígeno recombinante para incorporar en una nueva vacuna contra la enfermedad del tracto respiratorio bovino (ERB), utilizando un criterio industrial basado en la reducción de costos de producción. Dicho desafío fue planteado por la empresa Virbac Uruguay y se desarrolló en la planta piloto de laboratorios Celsius. Se decidió trabajar con un fragmento de la proteína leucotoxina de Mannheimia haemolytica (FLKT), la bacteria más patógena y comúnmente asociada con la ERB. Se optimizó la expresión de la FLKT recombinante, previo a las etapas de escalado industrial, para mejorar el rendimiento volumétrico. La optimización se realizó, por un lado, a nivel de los componentes del medio de cultivo y los parámetros de la fermentación, con el objetivo de aumentar la biomasa producida y el nivel de expresión de la FLKT. Por otro lado, se analizaron distintas estrategias de lisis celular, empleando disrupción, lisis química, y la combinación de las dos. Se logró optimizar la expresión de la FLKT recombinante en un reactor piloto, luego de poner a punto la concentración inicial de glucosa y alimentando el cultivo de una fuente de nitrógeno. Como resultado de la estrategia de optimización realizada durante esta tesis se escaló el protocolo de laboratorio a la escala piloto, a la vez que se obtuvo un rendimiento del proceso más de 3 veces superior al obtenido inicialmente, lo que permite viabilizar la producción industrial de esta proteína.
En
Thesis note
Trabajo de Grado (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería
Thesis degree name
Licenciada en Biotecnología
63 p. il., tbls., grafs
Notes
Incluye bibliografía, glosario y anexos
Vencimiento de confidencialidad: 20/04/2018.
Subject
PROYECTOS-BI, ENFERMEDADES DEL TRACTO RESPIRATORIO, PROTEÍNAS, TOXINAS MICROBIANAS, VACUNAS, GANADO
Type
Trabajo final de carrera
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Citation
Demarco Guareschi, O. (2016). Optimización de la producción de un fragmento de leucotoxina recombinante (Trabajo de Grado). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Recuperado de https://rad.ort.edu.uy/handle/20.500.11968/3727
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