Generación y caracterización de líneas celulares reporteras de la actividad del factor de transcripción nuclear factor kappa-b

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dc.contributor.advisorBollati Fogolin, Mariela Raqueles
dc.contributor.tribunalHill Mongabure, Marcelo Rafaeles
dc.contributor.tribunalCárdenas Rodriguez, Magdalenaes
dc.creatorMastropietro García, Giuliana Paula
dc.date.accessioned2017-06-14T12:13:58Z
dc.date.available2017-06-14T12:13:58Z
dc.date.issued2014es
dc.descriptionIncluye bibliografíaes
dc.descriptionCo-tutores: Karen Perelmuter Schein y María Inés Tiscornia Roblees
dc.descriptionVencimiento de confidencialidad: 24/04/2016.es
dc.description.abstractEn el presente trabajo se obtuvo una línea celular reportera de la actividad del Nuclear Factor Kappa-B (NF- κB) derivada de la línea parental Caco-2. Esta se caracterizó junto con la línea celular HT-29-pNF-κB-hrGFP, previamente generada en el laboratorio, y se comparó la respuesta de ambas frente a estímulos pro-inflamatorios. Para la generación de la línea reportera, se procedió a transfectar establemente con el plásmido pNFκB-hrGFP, que contiene el gen que codifica para la proteína GFP bajo el control de un promotor con múltiples sitios de unión a NF-κB, y luego se seleccionó con higromicina. Posteriormente, las fracciones celulares que respondieron a estímulos pro-inflamatorios fueron enriquecidas y clonadas mediante un separador celular. En aquellos clones seleccionados, se estudió, mediante citometría de flujo, la cinética de activación de NF-κB (porcentaje de células positivas para GFP) y su respuesta frente a diferentes concentraciones de los estímulos: Factor de Necrosis Tumoral-κ (del inglés, TumorNecrosisFactor-κ), Interleuquina-1βy Lipopolisacárido. Se observó una respuesta diferencial frente a los estímulos, incluso en clones de la misma línea, tanto en la curva dosis respuesta, como en la cinética de activación. Actualmente, se dispone de dos líneas reporteras bien caracterizadas, lo que permitirá monitorear compuestos moduladores de la vía NF-κB en estudios comparativos entre ambas.es
dc.format.extent74 p. il., tbls., grafs.es
dc.identifier.citationMastropietro García, G. P. (2014). Generación y caracterización de líneas celulares reporteras de la actividad del factor de transcripción nuclear factor kappa-b (Trabajo de Grado). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Recuperado de https://rad.ort.edu.uy/handle/20.500.11968/3013es
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11968/3013
dc.languageEspañoles
dc.publisherUniversidad ORT Uruguayes
dc.relation.otherhttps://bibliotecas.ort.edu.uy/bibid/78327es
dc.subjectCACO-2es
dc.subjectCITOQUINAS PRO-INFLAMATORIASes
dc.subjectFACTOR DE TRANSCRIPCIÓN NF-ΚBes
dc.subjectLÍNEAS CELULARES REPORTERASes
dc.subjectHT-29es
dc.subjectPROYECTOS-BIes
dc.titleGeneración y caracterización de líneas celulares reporteras de la actividad del factor de transcripción nuclear factor kappa-bes
dc.typeTrabajo final de carreraes
ort.thesis.careerFI - Licenciatura en Biotecnología - BIes
ort.thesis.degreegrantorFacultad de Ingenieríaes
ort.thesis.degreelevelCarrera Universitariaes
ort.thesis.degreenameLicenciada en Biotecnologíaes
ort.thesis.degreetypeTrabajo de Gradoes
ort.thesis.noteTrabajo de Grado (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingenieríaes
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