Caracterización de la línea celular Swan 71

Abstract

El presente trabajo surge a partir del interés de una empresa en la investigación de los mecanismos de invasión e implantación en el útero materno durante el embarazo. Para posibilitar dicha investigación, se aborda la caracterización de un clon de la línea celular Swan 71, constituida por citotrofoblastos de primer trimestre de embarazo, almacenado en el banco celular del Laboratorio de Biotecnología de la Universidad ORT Uruguay. Esto se lleva a cabo con el fin de validar sus características e identificar y registrar desviaciones para, de esta forma, asegurar resultados confiables y reproducibles. Para ello, se estudia la tasa de crecimiento de la línea celular en diferentes concentraciones de SFB determinando diversos parámetros tales como velocidad máxima de crecimiento y tiempo de duplicación. Por otra parte, se analiza la morfología celular a distintas densidades y el contenido cromosómico mediante la realización de un cariotipo. Se evalúa la excreción de hCG empleando dos métodos distintos, así como la presencia de las metaloproteasas MMP-2 y MMP-9 en muestras de sobrenadante de cultivo celular. A su vez, se realiza un análisis de contenido de ADN y ciclo celular de la población mediante citometría de flujo. Se observa que la línea celular tiene un tiempo de duplicación en promedio de 1,5 días y una velocidad de crecimiento de 0,46 días-1. La morfología de la línea celular se asemeja a la de un trofoblasto primario con características de citotrofoblastos tanto vellosos como extravellosos. Los resultados del contenido cromosómico muestran un cariotipo principalmente pentaploide con diversas aberraciones cromosómicas. Por otro lado, no se observa presencia de hCG en el sobrenadante de cultivo con las metodologías empleadas, pero sí se observa actividad de las MMP-2 y MMP-9 en el mismo. El análisis mediante citometría de flujo, muestra que la población pasa un largo período en la fase S del ciclo celular. De esta manera, se logra cumplir con los objetivos de caracterizar a la línea celular Swan 71 a un pasaje promedio entre 17 y 27.